猪圆环病毒2型Cap蛋白家蚕表达体系的构建与鉴定

摘要

为了用家蚕杆状病毒表达系统表达猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白,将不同株系的PCV2 Cap蛋白基因、人工改造的Cap蛋白突变体基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体,用共转染技术成功构建了重组杆状病毒。将重组杆状病毒感染家蚕,成功获得了大量Cap蛋白的表达产物。结果表明,纯化蛋白主要为病毒空衣壳粒子,推算PCV2空衣壳在家蚕中的表达量可达1.2 mg/蛹~1.6 mg/蛹。电镜观察可见到完整的空衣壳粒子,胶体金标记免疫电镜观察可见到完整的胶体金粒子,金粒大小为10 nm。