不同提取方法对食蟹猴粪便中结肠小袋虫PCR检测的影响

摘要

比较不同抽提方法对结肠小袋虫DNA提取效率的影响,从而获得一种高效、稳定的提取粪便样品总DNA的方法,继而为后续试验提供基础材料.采用3种商品化基因组DNA提取试剂盒和经典酚-氯仿法,分别对食蟹猴粪便样品进行DNA提取,作为模板,进行PCR检测,观察不同抽提方法对DNA扩增效果的影响.4种提取方法均能扩增出目的条带,粪便抽提试剂盒的PCR扩增效果最好,测定DNA含量达到42.05 ng/μL.同时利用粪便抽提试剂盒对广西地区采集的68份食蟹猴粪便样品进行DNA提取,经PCR检测其阳性率为17.65％(12/68).4种提取方法中以粪便抽提试剂盒对粪便样品DNA提取后经PCR扩增效果最好,可为临床粪便样品DNA提取PCR检测提供参考.