表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析

李嘉琦; 吴娟; 孙茂盛; 戴长柏

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表达HAV结构基因的重组腺病毒鉴定及细胞病变分析

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利用RT-PCR方法,从HAV-L8株的RNA中扩增出结构基因(vp3+vp1),克隆到穿梭质粒pXCX2NotI上.采用磷酸钙-DNA共沉淀技术,将腺病毒载体pJM17与pXCX2-CMV-HAV共转染293细胞.在光学显微镜下观察到明显的细胞病变(CPE);经RT-PCR、免疫荧光染色和蛋白印迹鉴定证明HAV的结构基因已插入到腺病毒基因组中;在电子显微镜下观察发现有二十面体的病毒颗粒.以上结果表明获得了重组腺病毒rAdHAV,纯化后的rAdHAV滴度为1×109.0 TCID50/mL.

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来源
《动物医学进展》 |2003年第2期|68-71|共4页
作者
李嘉琦; 吴娟; 孙茂盛; 戴长柏;
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作者单位

中国医学科学院协和医科大学医学生物学研究所,云南昆明,650118;

中国医学科学院协和医科大学医学生物学研究所,云南昆明,650118;

云南烟草科学研究院生物技术重点实验室,云南昆明,650106;

中国医学科学院协和医科大学医学生物学研究所,云南昆明,650118;

中国医学科学院协和医科大学医学生物学研究所,云南昆明,650118;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R393.9;
关键词
重组腺病毒; HAV结构基因; 鉴定; 细胞病变(CPE);

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