猪圆环病毒1型和2型a与b基因型三重PCR鉴别方法的建立及应用

摘要

根据PCV-1、PCV-2a和PCV-2b差异序列,设计了3对特异性引物,通过优化反应条件,建立了可以用于PCV检测及PCV-1、PCV-2a和PCV-2b分型的PCR方法.结果表明,三重PCR检测的最低敏感度可达4.87×107 copies/μL(PCV-1)、2.83×107 copies/μL (PCV-2a)和2.96×106 copies/μL(PCV-2b).引物特异性良好,各引物之间没有交叉反应,对伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)检测均为阴性.应用该方法对采自陕西省的56份样品进行检测,PCV-1检出率57.14％(32/56),PCV-2a检出率1.78％(1/56),PCV-2b检出率42.86％(24/56),多重PCR检测结果与单PCR检测结果的符合率达99％以上,可用于猪圆环病毒的临床检测及流行病学监测等.