新城疫病毒实时荧光RT-LAMP检测方法的建立

摘要

新城疫是影响家禽养殖业的重大动物疫病,建立现场快速分子学检测方法是其防控关键.借助热裂解法抽提病毒RNA,在筛选出最佳核酸染料Calcein的基础上,建立新城疫病毒(NDV)实时荧光反转录环介导等温扩增(rRT-LAMP)检测法,并对该法进行特异性、敏感性及准确性分析.试验结果显示,本试验所建立的NDV-rRT-LAMP方法可有效鉴别NDV,其敏感性可检测至50个基因拷贝,与国家标准实时荧光定量RT-PCR检测法一致;该法特异性强,与AIV、IBV等常见禽呼吸道传染病病原无交叉反应.小规模田间试验显示,该法用于NDV的普查监测,结果可靠.结果表明,建立的NDV-rRT-LAMP检测法可满足NDV现场快速分子检测需求.