从干预SIRT1表达探究急性应激影响糖尿病小鼠葡萄糖代谢和脂肪代谢的机制

摘要

目的:从干预组蛋白去乙酰化酶(Sirtuin1,SIRT1)表达探究急性应激影响糖尿病小鼠葡萄糖代谢和脂肪代谢的机制.方法:以30只C57BL/6小鼠为研究对象,通过高脂饮食和链脲佐菌素腹腔注射诱导的T2DM模型小鼠,然后随机分为对照组(正常小鼠+柠檬酸盐缓冲液灌胃)、糖尿病组(糖尿病小鼠+柠檬酸盐缓冲液注射)和SIRT1干预组(糖尿病小鼠+SRT 1720的载体缓冲液灌胃).通过血糖仪和胰岛素ELISA试剂盒分别检测小鼠空腹血糖、胰岛素水平.使用血液化学自动分析仪检测小鼠血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白(LDL)-胆固醇和高密度脂蛋白(HDL)-胆固醇水平.收集小鼠白色脂肪组织冲洗并称重比较.通过RT-PCR分析脂肪生成转录因子PPARγ和SREBP-1c、脂肪酸合成因子Fas和Ap2、脂肪酸分解因子Hsl的mRNA表达.通过蛋白印迹分析AMPK-SIRT1-PGC-1通路蛋白的表达.结果:糖尿病组较对照组空腹血糖、胰岛素水平升高(P＜0.05),SIRT1干预组较糖尿病组空腹血糖、胰岛素水平降低(P＜0.05).糖尿病组较对照组血清甘油三酯、总胆固醇、HDL-胆固醇和LDL-胆固醇升高(P＜0.05).糖尿病组较对照组附睾、腹膜后、肠系膜和腹股沟脂肪的重量升高(P＜0.05),SIRT1干预组较糖尿病组的白色脂肪重量降低(JP＜0.05).SIRT1干预组较糖尿病组降低(P＜0.05).糖尿病组较对照组的血糖水平在30、60和120分钟时升高(P＜0.05),SIRT1干预组较糖尿病组各时间点血糖水平降低(P＜0.05).糖尿病组较对照组PPARγ、SREBP-1c、Fas、Ap2的mRNA表达升高(P＜0.05),Hs1mRNA降低(P＜0.05),SIRT1干预组较糖尿病PPARγ、SREBP-1c、Fas、Ap2的mRNA表达升高,HslmRNA降低(P＜0.05).糖尿病组较对照磷酸化AMPK、SIRT1和PGC-1的表达降低(P＜0.05),SIRT1干预组较糖尿病组磷酸化AMPK、SIRT1和PGC-1的表达升高(P＜0.05).结论:调控SIRT1高表达可激活糖尿病小鼠AMPK/PGC-1α信号通路,同时促进脂肪分解和抑制脂肪合成而表现出抗肥胖作用.