钌络合物通过诱发高尔基体应激在Walker-256荷瘤大鼠中发挥抗肿瘤作用的机制

摘要

目的:探讨钌络合物通过诱发高尔基体应激在Walker-256荷瘤大鼠中发挥抗肿瘤作用的机制.方法:以30只雄性Wistar大鼠为研究对象,通过Walker-256细胞右骨盆肢体皮下注射建立荷瘤大鼠模型,然后根据实验目的将大鼠分为3组,对照组(正常大鼠,PBS干预),肿瘤模型组(荷瘤模型大鼠,PBS干预)和钌络合物组[荷瘤模型大鼠,管饲法给予5mg/kg钌络合物溶液(由含2％ Tween的PBS溶解)],各10只.通过测厚仪和电子秤分别计算大鼠肿瘤体积及重量;酶联免疫吸附试验试剂盒检测大鼠刚脏组织匀浆中氧化应激水平;蛋白印迹和荧光探针DCFH-DA试剂盒分析LC3 Ⅱ/Ⅰ表达和ROS活性;蛋白印迹分析高尔基应激相关蛋白GOLPH3、GRASP65的表达;实时定量PCR分析Bax、Bcl-2和Caspase-3的mRNA表达.结果:钌络合物组较肿瘤模型组肿瘤重量降低(P＜0.05),肿瘤模型组较对照组体重增加降低(P＜0.05),钌络合物组较肿瘤模型组体重增加(P＜0.05).肿瘤模型组较对照组SOD活性和LPO升高(P＜0.05),CAT、GST和GSH活性降低(P＜0.05),钌络合物组较肿瘤模型组LPO降低(P＜0.05),CAT、GST和GSH活性升高(P＜0.05).肿瘤模型组较对照组LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达和ROS活性升高(P＜0.05),钌络合物组较肿瘤模型组LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达和ROS活性降低(P＜0.05).肿瘤模型组较对照组GOLPH3、GRASP65的蛋白表达升高(P＜0.05),钌络合物组较肿瘤模型组GOLPH3、GRASP65的蛋白表达降低(P＜0.05).肿瘤模型组较对照组Bax和Caspase-3的mRNA表达升高(P＜0.05),Bcl-2 mRNA表达降低(P＜0.05),钌络合物组较肿瘤模型组Bax和Caspase-3的mRNA表达降低,Bcl-2 mRNA表达升高(P＜0.05).结论:钌络合物通过调节高尔基应激反应,削弱氧化磷酸化从而促进Walker-256细胞死亡发挥抗肿瘤活性.