PVT1促进PAH大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和迁移的作用机制研究

摘要

目的:研究浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在肺动脉高压(PAH)大鼠中对于肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖和迁移的作用及其可能的机制.方法:将16只成年雄性SD大鼠随机分为肺动脉高压组(PAH组)和对照组,每组8只大鼠.PAH组大鼠通过单次项背部皮下注射MCT溶液造模,对照组大鼠给予单次项背部皮下注射等量生理盐水.通过胸右心室穿刺法测量右心室压力.取各组大鼠肺组织,并进行原代肺动脉平滑肌细胞分离培养.通过RT-qPCR和Western blot检测PVT1及Fxr1在PAH组织及PASMCs中的表达水平;通过HE染色评估PAH组织的血管壁形态;免疫荧光法检测HPASMC的纯度;CCK-8法和伤口愈合迁移实验检测PASMCs增殖和迁移情况.结果:与对照组相比,PAH组大鼠肺组织血管壁厚度偏厚、肺动脉压显著升高(P＜0.05).PVT1在PAH组大鼠的PAH组织和PASMCs中的表达水平显著上调(P＜0.05),且其表达与肺动脉压呈正相关.与对照组相比,转染sh-PVT1的PASMCs显示出较低的细胞活力,同时转染sh-PVT1有效敲低了PASMCs中PVT1的表达水平(P＜0.01).与对照组相比,PVT1的敲低抑制了PASMCs迁移能力(P＜0.01).在转染pcDNA-PVT1的PASMCs中发现较高的增殖能力,PVT1的过表达促进了PASMCs迁移能力(P＜0.01).与对照组相比,Fxr1在PAH模型组的PAH组织和PASMCs中的表达水平显著上调(P＜0.01).结论:PVT1通过调节Fxr1的表达促进PASMCs的增殖和迁移,PVT1可能是PAH诊断和预测指标.