硫酸-咔唑微孔板法检测肺炎链球菌荚膜多糖中糖醛酸含量

摘要

目的 利用微孔板检测肺炎链球菌荚膜多糖中糖醛酸含量,并对该方法进行验证及初步应用.方法 以微孔板为反应容器,对常规硫酸-咔唑法的咔唑质量浓度和加热时间进行优化;并对建立的方法进行线性范围、精密度以及准确度的验证及初步应用.结果 最佳的咔唑质量浓度为0.10 mg/mL,加热时间为20 min.标准品D-葡萄糖醛酸在4～40 μg/mL范围内,其质量浓度与校正后吸光值呈良好的线性关系,r2＞0.99;批内及批间CV值分别为1.54％ ～ 3.02％及4.53％ ～7.75％;加入5μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL D-葡萄糖醛酸的8-160502、9V-160102、22F-160103荚膜多糖,D-葡萄糖醛酸的回收率为92.21％～110.47％.微孔板法校正前与常规方法在测定肺炎链球菌荚膜多糖中糖醛酸含量时差异无统计学意义(P＞0.05),与校正后结果差异有统计学意义(P＜0.05).微孔板法测定分子质量分布与常规方法有较好的一致性.结论 硫酸-咔唑微孔板法可有效检测肺炎球菌荚膜多糖中糖醛酸含量,操作简便快捷,精密度和准确度良好,可用于肺炎链球菌荚膜多糖疫苗的质量控制.