一种改进的纯化和鉴定牛脑皮层G_s蛋白的方法

摘要

用１％胆酸钠和１５％饱和硫酸铵相结合的方法，从牛脑皮层细胞膜中抽提得到主要含激活型Ｇ－蛋白（Ｇ＿ｓ）和腺苷酸环化酶（ＡＣ）两种蛋白组分的制剂，然后通过Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ柱将两者分开．将含Ｇ＿ｓ高活力的级分用庚胺－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ柱进一步分离，即可获得高活力的Ｇ＿ｓ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示为分子量４５０００和３６０００的两条蛋白带．该法具有简便、快速、重复性好、产率高等优点，且可同时获得无Ｇ＿ｓ污染的ＡＣ．用无Ｇ＿ｓ污染的ＡＣ脂酶体测定Ｇ＿ｓ活力亦简便、可靠、灵敏度高．