脲梯度电泳方法的技术关键

摘要

介绍在应用丙烯酸胺－脲梯度电泳技术进行蛋白质折叠、去折叠研究工作中的实验步骤和技术关键，并在文献方法的基础上作了改进。通过加入１５％～０％的甘油，抵消在凝胶中由于脲浓度不同而引起的溶液粘度变化，保证在凝胶上脲浓度不同的部位对蛋白质保持同样的电泳阻力，防止前沿偏斜．采用核黄素光照催化合脲凝胶的聚合，以防止凝胶在梯度灌制完成前发生聚合．加浓缩胶和样品梳于脲梯度胶上可较好地克服边缘效应，获得好的样品迁移图谱．