鸭甲肝病毒RT-LAMP检测方法的建立

摘要

基于A型和C型鸭甲肝病毒(Duck hepatitis A virus,DHAV)3D基因的6个保守区域设计了4条引物,利用Bst DNA聚合酶在60℃恒温保持45min即可完成反转录和扩增反应,由此建立了鸭甲肝病毒的一步反转录环介导等温扩增(RT-LAMP)方法.该方法具有良好的特异性,除DHAV外,对其他4种常见鸭病的检测结果均为阴性.该方法对DHAV-A和DHAV-C病毒RNA的最低检出量均为0.1pg,是常规RT-PCR方法的10倍.临床应用结果表明,该方法与病毒分离鉴定方法的符合率为92.5％,而且对仪器要求低,适于基层实验室和现场检测.