抗水稻条纹病毒安全表达载体的构建及遗传转化

摘要

构建了水稻条纹病毒(RSV)外壳蛋白(CP)基因RNAi载体pCMBIA1301+/-R,该载体在理论上可以获得无标记基因的转基因后代植株.在双菌双质粒体系中,比较了不同品种、重组农杆菌浓度配比对遗传转化效率的影响.结果表明:改进的转化体系最适合品种‘爱知旭’的转化,共转化效率达9.07％;推广品种‘武育粳3号'上也转化成功获得了转基因阳性植株(6.59％).以‘爱知旭’为受体转化时,重组农杆菌E13R和E1301浓度比为3∶1时,共转化率最高(16.33％),其次分别是2∶1(13.56％)、1∶1(9.09％),以1∶2时最低(5.97％).通过T1代自交分离和抗病性筛选,成功获得了无选择标记基因的转基因抗病毒植株16株,为抗RSV转基因水稻的安全释放奠定了基础.