利用松茸ITS特异性引物对松茸分离物进行鉴定

摘要

利用一对ITS通用引物 (ITS4 ITS5 )和一对松茸物ITS特异性引物 (TMF TMR)对来源于云南省不同地区的 6个松茸 (Tricholomamatsutake)子实体及其 6株分离物 ,3个假松茸(Tricholomabakamatsutake)子实体及其 3株分离物、侧耳 (Pleurotusostreatus)、金针菇 (Flam mulinavelutipes)和双孢蘑菇 (Agaricusbisporus)的子实体进行了PCR扩增 ,琼脂糖凝胶电泳分析 ,结果表明ITS4 ITS5能将所有的样品扩增 ,并得到 6 0 0bp左右的DNA扩增条带 ,TMF TMR扩增时 ,只有松茸子实体及其对应分离物有扩增条带 ,DNA片段大小在 5 0 0bp左右。进一步对松茸子实体 (TG2 5 )及其分离物 (TM2 5 112 2 )进行ITS序列测定表明两者的DNA同源性为 10 0 % ,从而证明所分离到的 6个菌株确为松茸的纯培养物。