Microtox中药注射剂微毒测试体系明亮发光杆菌502和青海弧菌Q67发光反应条件的比较研究

摘要

目的:基于明亮发光杆菌502和青海弧菌Q67的Microtox微毒测试体系比较研究,明确两者适宜的反应条件.方法:①考察明亮发光杆菌502和青海弧菌Q67在15℃±1℃、20℃±1℃、25℃±1℃下的相对发光情况;②采用Plackett-Burman法优化设计影响明亮发光杆菌502和青海弧菌Q67发光的因素;③采用Plackett-Burman法优化得到的反应体系,考察不同pH复苏液对上述两种细菌相对发光强度的影响.结果:①明亮发光杆菌502的相对发光强度随温度的升高而增强,而青海弧菌Q67的相对发光强度随温度的升高先增强后减弱.②Plackett-Burman法得到最优发光条件为:明亮发光杆菌502冻干粉平衡10min后加入复苏液2ml,混匀15min,取100μl菌液测试初始发光度,随后立即加入1ml复苏液或待测样品,反应15min后再次测试相应发光强度;青海弧菌Q67冻干粉平衡10min后加入复苏液2ml,混匀10min,取100μl菌液测试初始发光度,随后立即加入2ml复苏液或待测样品,反应10min后再次测试相应发光强度.③复苏液pH 3.6-pH3.8时对明亮发光杆菌502发光的影响由抑制转为增强;复苏液pH 4.5-pH5.0时对青海孤菌Q67发光强度的影响＜±15％.结论:与明亮发光杆菌502比较,青海弧菌Q67具有更宽的pH耐受范围并且在检测时无需调节待测样品渗透压.