用细菌噬菌体T7 RNA聚合酶高效表达天蚕蛾菌素基因

摘要

将经聚合酶链反应 (PCR)扩增的 156 bp Cecropin A基因 Ce克隆于载体 p Bluescript(PBS) II KS(+ )上 ,得到重组质粒 p BCe。将该质粒转入 E.coli LE392 .2 3菌株中 ,以含有 T7RNA聚合酶 Gene 1克隆的噬菌体 DE2进行感染表达已克隆的 p BCe基因。提取基因表达产物后进行Western blot分析 ,并进行产物的抗 E.coli JM10 1菌株生长活性试验。结果表明 ,在菌体合成的总蛋白中有 Cecropin A成分存在 ,其含量约占菌体总蛋白的 10 % 。