门冬酰胺酶反相高效液相分析方法的初步研究

摘要

L-门冬酰胺酶(EC3.5.1.1)是一种专一性水解胞外L-门冬酰胺的蛋白酶,该酶主要用于治疗小儿急性淋巴细胞白血病。目前对该产品的鉴别方法之一是收录在2015年版《中国药典》中的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。研究门冬酰胺酶样品在反相分析方法的流动相中,样品结构和活性变化情况,作者收集了门冬酰胺酶样品在RP-HPLC色谱法中出峰阶段的组分,并分析其生物活性和蛋白一级结构。分析检测结果表明,门冬酰胺酶样品在反相分析方法的流动相中完全失去生物活性,但其蛋白一级结构没有改变。