人肝细胞生长因子cDNA的克隆及其在Pichia系统中的表达

摘要

采用 RT- PCR方法以胎肝 m RNA为模板克隆人肝细胞生长因子全长 c DNA,核苷酸序列分析证实比文献报道多 2个氨基酸编码序列。经与 Pichia分泌型表达载体 p PIC9重组 ,表达质粒转化 GS115细胞 ,mut+ 表型筛选 ,经甲醇诱导实现了 h HGF在 Pichia Pastoris酵母系统中分泌型表达 ,SDS- PAGE电泳 ,银染法分析证实表达产物分子量为 80～ 85KD左右 ,具有刺激肝细胞增殖活性。