Notch信号通路调控骨肉瘤细胞增殖的机制研究

摘要

目的 观察Notch通路阻断剂DAPT和Notch通路激动剂Jagged1对人骨肉瘤143B细胞和MG63细胞体外增殖和体内成瘤的影响,探讨Notch信号通路在骨肉瘤细胞增殖中的调控作用.方法 体外培养人骨肉瘤143B细胞和MG63细胞,采用CCK-8法、集落形成试验以及BrdU染色法检测DAPT和Jagged1对两种细胞增殖的影响;在体内利用裸鼠成瘤试验,观察DAPT对于骨肉瘤细胞体内成瘤能力的调控作用,并对肿瘤组织进行切片染色,观察肿瘤组织恶性程度的变化情况.结果 CCK-8法检测结果表明DAPT显著抑制143B细胞和MG63细胞的增殖,且和浓度呈正相关,但10 μM的DAPT与20 μM的DAPT对143B细胞的增殖抑制能力无明显差异.肿瘤集落形成试验结果表明DAPT能够显著抑制肿瘤集落的形成.BrdU染色结果显示DAPT组的BrdU阳性细胞明显少于对照组和Jagged1组,而Jagged1组的阳性细胞数明显多于对照组.体内裸鼠成瘤实验结果显示,与对照组相比,DAPT组能够明显抑制肿瘤大小,Ki67阳性率降低.HE染色结果显示,DAPT组肿瘤组织中的细胞核数量和血管数量明显减少,且组织内部更加疏松.结论 Notch信号通路参与调控人骨肉瘤143细胞和MG63细胞的体外增殖与体内成瘤行为,抑制Notch通路的表达可能成为骨肉瘤治疗的重要靶点.