干扰miRNA-183表达对食管癌细胞凋亡的影响及机制研究

摘要

目的 探讨干扰微小RNA-183(miRNA-183)表达对食管癌细胞凋亡的影响及其分子机制.方法 采用荧光定量PCR检测食管癌组织及细胞中miRNA-183的表达情况.以加入脂质体和miRNA-183 inhibitor的细胞为miRNA-183 inhibitor组,以加入脂质体和miRNA-183 inhibitor negative control的细胞为阴性对照组,以加入等量脂质体的细胞为空白对照组,采用荧光定量PCR检测其转染效果.转染48 h后,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中Bcl-2和p53蛋白的表达水平.结果 与正常食管组织和正常食管上皮细胞比较,miRNA-183在食管癌组织和食管癌细胞中的表达均上调(P＜0.05).脂质体转染细胞48 h后,miRNA-183 inhibitor组细胞的miRNA-183相对表达量低于空白对照组(P＜0.05),阴性对照组和空白对照组的miRNA-183相对表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).miRNA-183 inhibitor组的细胞凋亡率和p53蛋白表达水平均高于空白对照组,Bcl-2蛋白表达水平低于空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).空白对照组和阴性对照组的细胞凋亡率、p53蛋白、Bcl-2蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 miRNA-183在食管癌组织和食管癌细胞中呈高表达,抑制其表达可促进细胞凋亡,其作用机制可能与上调p53蛋白和下调Bcl-2蛋白的表达有关.