条石鲷mPRα基因的cDNA克隆和表达模式分析

摘要

采用同源性克隆和末端快速扩增(RACE)方法,首次获得全长为1222bp的条石鲷膜孕激素受体α(mPRα)的cDNA序列.其开放阅读框为1060bp,编码了含353个氨基酸的蛋白,N端前16个氨基酸为信号肽.氨基酸序列比较分析发现其存在7个跨膜区域.其预测的蛋白质三级结构中存在着多个蛋白结合位点.同源性比较和进化分析表明,条石鲷mPRα与鲈形目鱼类mPRα聚为一支,进化关系较近,相似度达到95％以上.实时荧光定量PCR方法检测mPRα mRNA表达情况:发现mPRαmRNA在性成熟雌性条石鲷各组织均有表达,并在脑、垂体和卵巢组织中的表达较丰富.在条石鲷繁殖周期的脑和垂体组织中,mPRα mRNA的表达水平在卵巢发育的Ⅳ期达到最大值;在繁殖周期的卵巢组织中,mPRα mRNA的表达水平从卵巢发育Ⅲ期到Ⅴ期持续升高并且在Ⅴ期达到最大值(P＜0.05).条石鲷雌鱼血清中雌二醇激素的含量变化在整个繁殖周期中差异显著(P＜0.05),在性腺发育Ⅲ期含量迅速升高并在Ⅳ期达到峰值.本研究为条石鲷卵巢成熟调控机制研究提供了基础参考资料.