补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植对脊髓损伤气虚血瘀证的疗效

摘要

目的:探讨补阳还五汤(BYHWD)联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤(SCI)气虚血瘀证的疗效,并探讨其分子机制.方法:将120只雄性SD大鼠随机分为5组:对照组、气虚血瘀组、BYHWD组、BMSCs组、BYHWD+BMSCs组,每组24只.制作SCI气虚血瘀证复合动物模型,并分别予以BYHWD、BMSCs或BYHWD+BMSCs治疗28 d.治疗前、治疗后1 d、14 d、28 d通过自发性直立探究行为观察前肢运动功能恢复情况;治疗后28 d,ELISA法检测脊髓损伤局部cAMP浓度,HE染色观察损伤局部轴突形态,免疫组织化学法检测脊髓损伤局部RhoA、神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)的表达.结果:治疗后,BYHWD组、BMSCs组和BYHWD+BMSCs组大鼠的前肢使用率均高于气虚血瘀组,脊髓cAMP含量均高于气虚血瘀组(均P<0.01),且BYHWD+BMSCs组高于BYHWD组和BMSCs组(均P<0.05或P<0.01).HE染色显示气虚血瘀组、BMSCs组脊髓右后外侧索轴突水肿或缺失,髓鞘排列散乱;BYHWD组、BYHWD+BMSCs组脊髓损伤程度减轻.与气虚血瘀组相比,BYHWD组、BYHWD+BMSCs组NGF、BDNF阳性表达升高,BMSCs组BDNF阳性表达升高,RhoA表达下降(P<0.05或P<0.01);且BYH-WD+BMSCs组BDNF表达水平高于BYHWD组和BMSCs组(P<0.05),RhoA表达水平低于BYHWD组和BMSCs组(P<0.05).结论:BYHWD联合BMSCs移植对保护SCI气虚血瘀证脊髓局部轴突、改善前肢运动功能可产生协同增效作用,其作用机制可能与上调脊髓局部微环境cAMP浓度,抑制RhoA表达,上调NGF、BDNF有关.