神经生长因子在肝纤维化大鼠肝星状细胞凋亡中的作用

摘要

目的探讨神经生长因子（NGF）在肝纤维化大鼠肝星状细胞（HSC）增殖、凋亡中的作用。方法HSC株分别在实验组（分别以NGF 50、100和150ng／ml干预HSC）和对照组（单纯HSC培养）中体外培养24、48和72 h。应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖率;原位杂交凋亡检测（TUNEL）法观察HSC凋亡状况;流式细胞术检测细胞凋亡率;显微镜观察细胞形态学变化。结果①MTT法显示,不同浓度的NGF作用HSC 24 h,实验组HSC增殖率均低于对照组,差异有统计学意义（均P＜0．05）。NGF浓度为100 ng／ml时,HSC增殖率低于对照组最显著（0．63±0．02 vs 0．77±0．03,P＜0．05）;②最适浓度的NGF（100 ng／ml）作用HSC 24、48和72 h,第72小时的HSC增殖率低于对照组最显著（0．48±0．03 vs 0．89±0．01,P＜0．05）,增殖率的降低呈时间依赖性;③最适浓度的NGF（100 ng／ml）作用HSC 24 h,TUNEL法显示HSC凋亡率显著高于对照组（10．2％±1．2％vs 1．6％±0．1％,P＜0．05）;同时,流式细胞术显示HSC凋亡率为6．2％±0．2％,而对照组无凋亡;④NGF对HSC形态没有明显影响。结论NGF可诱导体外活化的HSC凋亡。