用激光捕获显微切割联合蛋白质芯片筛选肺鳞癌和腺癌组织差异蛋白

摘要

目的应用激光捕获显微切割（LCM）联合表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）蛋白质芯片及支持向量机（SVM）方法筛选肺鳞癌和腺癌差异表达蛋白质,探讨二者在蛋白水平的差异,为筛选肺癌分型标志物提供依据。方法将6例新鲜肺鳞癌及7例腺癌组织标本用 LCM 选择性获取1.4×10~5个同质鳞癌细胞和1.2×10~5个同质腺癌细胞。经 PBSⅡ+型SELDI-TOF-MS 分析仪（IMAC 芯片）分析鳞癌及腺癌细胞蛋白质表达谱,比对差异峰;应用 SVM 筛选并验证候选标志蛋白的判别效能。结果比较鳞癌和腺癌细胞的 SELDI 谱图,共筛选出87个蛋白峰。将差异最明显的10个蛋白峰作为候选标志蛋白。与腺癌相比,4种蛋白（相对分子质量分别为2505、4004、4847及11 412）在鳞癌中呈高表达;与鳞癌相比,6种蛋白（相对分子质量分别为3333、3592、3848、5036、5191及5211）在腺癌中呈高表达。其中相对分子质量为4847的蛋白在鳞癌和腺癌中表达差异有统计学意义。用 SVM 建立分类预测模型并评价各模型效能,筛选出一个由3种蛋白质（相对分子质量分别为4847、11 412和3592）组成的分型标志蛋白组合模式,其敏感度和特异度均为100%。结论肺鳞癌和腺癌在蛋白水平存在差异;LCM 联合 SELDI 蛋白质芯片技术有可能筛选出敏感性高、特异性强的肺癌分型标志蛋白组合模式。