siRNA抑制乙型肝炎病毒在HepG2.2.15细胞中的复制与表达

摘要

目的探讨靶向HBV s基因的siRNA表达质粒在HepG2.2.15细胞中对HBV病毒的复制与表达的抑制效应及其抗病毒活性。方法设计并构建了两个靶向HBV S基因的siRNA表达质粒S1和S2,随机设计的用于对照的非同源siRNA表达质粒S3。首先在HepG2.2.15细胞中通过实时荧光定量PCR评估该siRNA表达质粒对HBV mRNA表达的抑制效应,接着在HepG2.2.15细胞中通过ELISA方法进一步检测它们的抗病毒活性细胞上清液中HBV标志性蛋白HBsAg、HBeAg的表达水平。结果在siRNA表达质粒转染HepG2.2.15细胞后48 h,HBV S基因mRNA表达量下降64%～88%,HBsAg和HBeAg的表达水平分别降低了60%～82%和56%～78%。S1+S2联合使用转染细胞中显著抑制HBV病毒的复制与表达的效率,而对照组S3无抑制效果。结论发现靶向HBV S基因的siRNA表达质粒能够在HepG2.2.15细胞中有效的抑制HBV病毒的复制与表达,并能够降低细胞上清液中HBsAg和HBeAg的表达水平。S1+S2联合使用转染细胞中可以显著抑制HBV的复制与表达的效率。RNAi可能成为防治HBV感染有效的全新的抗病毒防御策略。