一种简便、快速测定鹅膏多肽毒素的方法--抑芽法

摘要

低浓度（5-10ngml-1）的鹅膏毒肽(amatoxins) 能专一性抑制RNA聚合酶Ⅱ的活性，高浓度（为RNA聚合酶Ⅱ103-104倍的浓度）也能抑制RNA聚合酶Ⅲ的活性，因而影响细胞mRNA的转录和蛋白质的合成，抑制种子的萌发和生长。根据此原理我们建立了一种以植物种子萌发试验检测鹅膏毒肽的方法，称之为"抑芽法"（bud-inhibited assay）。该方法简便、实用、准确。操作流程：45℃干燥至恒重的鹅膏菌等子实体菌盖；水提法提取毒素并用氯仿沉淀蛋白质等；粗毒液浓度为0.025-0.05gml-1干子实体；萝卜或绿豆种子培养温度为28℃，培养时间为24-72h。绿豆芽下胚轴生长被抑制率在95%以上，可能为鹅膏毒肽含量高的剧毒鹅膏菌；当被抑制率在60-80%，可能为鹅膏肽含量较低的微毒鹅膏菌；当被抑制率在30%以下时，可能是不含鹅膏菌肽的鹅膏菌。