南蛇藤提取物对过表达mTOR的人肝癌HepG2细胞株的影响

摘要

目的:构建过表达雷帕霉素靶蛋白(Mammalian Target of Rapamycin,mTOR)的人肝癌HepG2细胞,并研究中草药南蛇藤Celastrus orbiculatus Thunb.提取物对该细胞的影响。方法:利用分子生物学技术,将GV238-mTOR重组质粒转染人肝癌HepG2细胞,分别用荧光素酶活性检测和Western Blot实验,分析转染后的细胞中mTOR的表达水平。人肝癌HepG2/mTOR^(++)细胞中,加入不同浓度的南蛇藤提取物(20、40、80、160、320μg·m L^(-1))作用24 h后,分析南蛇藤提取物对mTOR蛋白的作用。结果:经转染的人肝癌HepG2细胞中,mTOR蛋白的表达水平显著增加。南蛇藤提取物明显抑制肝癌细胞的增殖,并明显降低细胞内mTOR蛋白的表达。结论:本实验成功获得能稳定过表达mTOR的人肝癌HepG2细胞株。南蛇藤提取物明显抑制肝癌细胞内mTOR蛋白的表达水平。