安肠汤对重症溃疡性结肠炎大鼠PKC/NF-κB/SOCS3通路及甘氨酸表达的影响

摘要

目的观察安肠汤对重症溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中PKC/NF-κB/SOCS3通路相关因子及血浆和粪便中甘氨酸代谢水平的影响,探究安肠汤的作用机制。方法将72只健康Wistar大鼠(雌雄各半)随机分为6组,每组12只。正常组常规饲养,其余组采用50 mg/kg的TNBS+等容积50%乙醇混合液连续灌肠3 d建立重症溃疡性结肠炎模型。造模后第7天开始,安肠汤低、中、高剂量组分别给予50 mg/mL安肠汤0.53 mL、1.1 mL、3 mL灌胃,美沙拉嗪组给予5 mg/mL美沙拉嗪混悬液0.35 mL灌胃,空白组和模型组给予生理盐水灌胃,灌胃量均为3 mL,均每日1次,连续7 d。记录各组大鼠一般情况,DAI评分评价造模第7天和灌胃第7天病情严重程度;灌胃7 d后处死各组大鼠,HE染色进行大鼠结肠黏膜组织观察,Western blot法和RT-PCR法分别检测结肠组织中PKC、NF-κB、SOCS3蛋白及mRNA表达情况,液相质谱法检测大鼠血浆及粪便样本中甘氨酸浓度。结果造模第7天,各造模组大鼠出现明显溃疡性结肠炎表现,DAI评分均高于3分,部分大鼠死亡;灌胃第7天,各药物组大鼠溃疡性结肠炎表现明显减轻,DAI评分均明显低于模型组(P均<0.05),且美沙拉嗪组和安肠汤中、高剂量组DAI评分均明显低于安肠汤低剂量组(P均<0.05)。模型组大鼠结肠组织HE染色显示黏膜糜烂明显,各药物组均轻于模型组,其中美沙拉嗪组和安肠汤中剂量组恢复更好。模型组大鼠结肠组织中PKC、NF-κB、SOCS3蛋白和mRNA表达量及血浆和粪便中甘氨酸浓度均明显高于空白组(P均<0.05),各药物组NF-κB、SOCS3蛋白和mRNA表达量及血浆和粪便中甘氨酸浓度均明显低于模型组(P均<0.05);各药物组PKC蛋白表达量均明显低于模型组(P均<0.05),而PKC mRNA表达量均明显高于模型组(P均<0.05),且安肠汤各组较美沙拉嗪组变化明显。结论安肠汤可促进重症溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜恢复,机制可能与通过影响结肠组织中PKC、NF-κB、SOCS3表达和血浆、粪便中甘氨酸含量,抑制NF-κB炎症通路有关。