D159687减轻神经元氧化应激损伤的作用机制研究

摘要

cqvip:目的研究D159687对过氧化氢(H2O2)所致的小鼠海马神经元HT22细胞损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法实验分为正常对照组、模型组、D1596870.5μmol/L组、D1596871μmol/L组、D1596872μmol/L组、D1596874μmol/L组。将HT22细胞株接种于96孔板,对照组采用10%胎牛血清的DMEM高糖培养基培养,其他组加入不同浓度的D159687进行干预培养,后经H2O2损伤。CCK-8法测定各组细胞存活率,Western blot法检测Caspase-3和NADPH氧化酶亚基gp91phox、p47phox表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况,并测定各组细活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果模型组细胞存活率、SOD活性均显著低于正常对照组(P均<0.05),ROS表达水平、MDA含量及Caspase-3、p47phox、gp91phox蛋白表达水平均显著高于正常对照组(P均<0.05);D1596870.5μmol/L组、D1596871μmol/L组、D1596872μmol/L组、D1596874μmol/L组细胞存活率、SOD活性显著高于模型组(P均<0.05),ROS表达水平、MDA含量及Caspase-3、p47phox、gp91phox蛋白表达水平均显著低于模型组(P均<0.05)。结论在0.5~4μmol/L浓度范围内,D159687浓度依赖性地拮抗H2O2所致HT22细胞损伤,同时抑制HT22细胞凋亡,这种作用可能与其抑制NADPH氧化酶关键亚基gp91phox和p47phox蛋白表达有关。