诱导HEK293细胞增殖中钙离子及TRPC6的变化及意义

摘要

目的 建立AngⅡ诱导人胚肾细胞增殖模型,探讨增殖效果与Ca2+变化及TRPC6表达的关系.方法 用不同浓度AngⅡ诱导细胞,在不同时间(0,6,12,24,48 h),予LOS干预24 h后用激光扫描共聚焦显微镜测Ca2+变化,RT-PCR、Western Blot检测TRPC6表达情况.采用MTT法及台盼蓝法检测细胞增殖及活性,确定最适浓度及时间构建增殖模型.结果 AngⅡ10-6mol/L诱导HEK293 24 h后细胞增殖及Ca2升高明显,LOS干预后细胞增殖及Ca2+明显下降.TRPC6表达(+/-),胞膜、胞质定位不清.结论 HEK293细胞自身无明显表达TRPC6,可利用此表达系统进一步研究外源性TRPC6与Ca2+变化的关系.AngⅡ诱导HEK293细胞增殖与Ca2+升高有关,具有一定的时间和剂量依赖性.