肾细胞

摘要： 目的探究细胞骨架调控蛋白Twinfilin-1过表达对镉诱导肾细胞重金属中毒及凋亡的影响。方法体外培养猪肾细胞LLC-PK1,随机分为对照组、模型组、模型+pc DNA空载体组、模型+Twinfilin-1过表达组,以8μmol/L镉处理细胞24 h建立重金属中毒模型。采用实时荧光PCR技术和蛋白印迹实验检测Twinfilin-1的表达,CCK8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电位的变化,蛋白印迹检测凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase3、9)]水平。结果与对照组比较,模型组Twinfilin-1 mRNA及蛋白水平、细胞增殖能力、线粒体膜电位降低,细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、cleaved cas9/cas9及cleaved cas3/cas3水平增加(P0.05)。结论Twinfilin-1过表达可能通过下调凋亡关键因子Bax/Bcl-2水平,抑制Caspase3、9的活化,减少细胞凋亡,维持正常线粒体膜电位,从而保护镉诱导肾细胞重金属中毒。

摘要： 我们身体有这样一个“劳模”器官,它时刻在过滤身体的“垃圾”,孜孜不倦地进行“排泄”。它就是肾脏,其细胞在长期的工作过程中会不可避免地受到损伤,而损伤的肾细胞则有可能恶变为癌细胞。癌细胞通过不断生长和分裂,就会形成肿块,这些肿块也就是我们所说的肾癌。因此,年过40岁以及10类高危人群应每年进行肾脏B超检查。

摘要： 近年我国的水禽养殖业迅速发展,但对于鸭鹅等水禽的疾病防控主要专注于禽流感、新城疫等疾病。自2017年起于我国养鹅场突然爆发的雏鹅痛风至死亡等的疾病,由于缺乏适宜的实验室宿主系统,对病毒的分离鉴定及后续疫苗的开发产生深远影响。因此为便于日后的病毒扩增及深入研究,将原代鹅肾细胞进行永生化培养。研究主要针对鹅构建永生化细胞系,使用22日龄左右鹅胚,处理组织剪碎消化,采用组织块贴壁法培养原代细胞。经感受态细胞扩增PcDNASV40-LT质粒载体,设定引物并用PCR对质粒DNA进行验证,证明质粒扩增表达成功后转染原代培养的鹅肾组织细胞。通过直接接触法进行细胞转染,随后采用抗生素筛选出获得SV40-LT基因表达的阳性细胞,挑取单一转化灶经过多次传代培养,成功建立鹅肾细胞系。

摘要： 敌敌畏染毒肾细胞,研究敌敌畏对肾细胞增殖的影响;检测其关键基因的表达，在一定范围内，敌敌畏对肾细胞具有生长抑制作用，呈时间一剂量效应;其中30uM敌敌畏处理肾细胞12h-48h，随处理时间延长miR-513的相对表达量先升高再降低，说明敌敌畏作用肾细胞影响miR-513的表达量;30uM敌敌畏处理24h细胞出现凋亡现象，且预测miR-513的靶基因MDM2, EI24均与凋亡相关，说明miR-513表达量的变化对细胞凋亡有一定影响。

摘要： 目的：探讨槲皮素能否对镉诱导的小鼠肾细胞自噬起抑制作用,并研究其抑制镉损伤的机制. 方法：128只雄性小鼠随机分4组,给予生理盐水、氯化镉(或)和槲皮素腹腔内注射3天,取双侧肾脏.观察肾细胞自噬体的形态,检测LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值、ROS水平、总抗氧化能力和脂质氧化(MDA)含量.所有数据均采用SPSS21.0统计软件进行分析. 结果：与对照组相比,镉组小鼠肾细胞自噬体形态明显,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值、ROS水平、MDA含量明显增高,总抗氧化能力降低.与镉组相比,联合组小鼠LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值、ROS水平、MDA含量明显降低,总抗氧化能力增强. 结论：0.2mg/kg浓度的镉通过抑制细胞内总抗氧化能力,使细胞产生大量的活性氧自由基(ROS),导致氧化应激,促进细胞内脂质氧化,最终诱导小鼠肾细胞自噬.槲皮素通过提高细胞内总抗氧化能力,减少细胞内活性氧自由基(ROS)的产生,抑制氧化应激,抑制细胞内脂质氧化,最终抑制了镉诱导的小鼠肾细胞自噬.

摘要： 采用常用的方法分离培养肾细胞,并提出优化方案.A法:采用组织块培养法;B法:采用1％胶原酶消化法分离法;C法:5％胰蛋白酶消化法;D法:采用0.5％胰蛋白酶-0.02％EDTA连续分离法.结果表明:A法初期细胞生长不好,1周后生长良好;B法、C法细胞贴壁状况较好,但细胞生长不均一,呈丘陵状生长,细胞产量较少.试验证实:D法采用0.5％胰蛋白酶-0.02％EDTA连续消化分离法消化肾组织块,能够快速获得大量细胞,并且细胞生长整齐、均一,能够满足后续实验的需要.

摘要： 以肾细胞悬液为实验对象，可视化研究了不同降温速率下细胞的脱水传质过程，观察了冻结过程中细胞体积的变化，针对胞外冰存在的条件和不同的降温速率，根据细胞水分渗透模型计算出细胞膜水渗透系数。同时，根据不同（渗透条件下）细胞的渗透平衡体积，依据Boylevan't Hoff方程预测了细胞的非渗透体积，其体积为0.31V0。计算表明：细胞膜水分渗透系数随冻结的深度逐渐减小。较小的降温速率能保证细胞在冻结过程中具有相对较大的渗透系数，有利于细胞内水分的安全渗出。

摘要： 应用阳离子脂质体介导法,将含绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒pEGFP-N1转染到培养成单层的草鱼肾细胞(CIK)中,通过荧光倒置显徽镜和特异性RT-PCR方法检测GFP的表达.在荧光倒置显微镜下可见CIK细胞的胞质和胞核均呈现绿色荧光,且细胞核的绿色荧光强度强于细胞质.转染细胞中的转录产物经RT-PCR扩增后,凝胶电泳鉴定出与GFP基因片段分子量大小一致的条带.可见,GFP基因可以被转染至CIK细胞中,并在该细胞中成功表达.

摘要： 目的：脂肪酸转运酶(FAT/CD36)在调节脂肪酸在肾脏的跨膜转运起到重要作用。正常状态下，FAT/cD36作为B类清道夫受体在巨噬细胞有高表达，若在内皮细胞、肾小管上皮细胞等上有表达增强，则提示与一些病理改变有关。炎症是否能干扰肾细胞FAT/CD36表达而进一步导致肾脏细胞脂肪酸代谢紊乱鲜见报道。因此本研究旨在应用肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞作为体外实验模型，初步观察在炎症和脂肪酸负荷状态下肾细胞FAT/cD36的表达以及胞内脂质的积聚情况。结论：炎症明显上调脂肪酸负荷的肾细胞FAT/CD36表达，加重胞内脂质积聚。

摘要： 花背蟾蜍(Bufo raddei)以皮下注射0.0、12.5、25.0 mg·kg-1剂量五氯酚(PCP)方式染毒,且设一丙酮阳性对照,分别于染毒3 h、24 h和48 h后,微核实验观察血红细胞微核率；高效液相色谱法测定肝、肾中PCP的含量；单细胞凝胶电泳法(SCGE)测定肝、肾细胞DNA单链损伤情况。结果显示,处理组核异常率及微核率明显高于空白与对照,PCP明显诱导了花背蟾蜍肝、肾细胞DNA损伤；处理组肝细胞DNA损伤率及损伤程度均明显高于对照组(P<0.01),且肝细胞DNA损伤率及损伤程度都高于肾细胞。总之,PCP时花背蟾蜍具有明显的遗传毒性效应,利用微核及SCGE技术可对PCP导致的生物基因毒性作用进行监测。

摘要： 本实验旨在研究猪SAP基因在猪PK15细胞中的表达情况,以分析该SAP基因的的保守程度,以进一步确定其生理功能,为解决器官免疫移植,可以避免免疫排斥反应的发生提供理论依据.本次试验主要通过猪肝脏组织细胞中提取RNA,然后进行反转录操作以获得cDNA(PT-PCR),通过基因克隆技术等最终将含目的基因载体转染到猪pk15(肾细胞)中,利用荧光显微技术,分析SAP基因在猪pk15细胞中表达情况.本次试验结果表明猪SAP基因在猪pk15细胞中表达不明显而且具有显著致死作用.

摘要： 用继代猫肾细胞(FK81)从疑似猫泛白细胞减少症的急性期粪便中分离到一株病毒,经血凝及病毒交叉血凝抑制试验、免疫荧光抗体试验、免疫电镜观察、细胞病变特征和中和试验鉴定,证明所分离的病毒为猫泛白细胞减少症病毒,命名为BJ-JB-8。

摘要： 本文以新城疫病毒(Newcastle Disease ViruS,NDV)TS09耐热株为研究对象,开展了该毒株的BHK细胞适应性培养研究.通过培养条件的优化、连续传代培养及极限稀释法纯化,获得了一株新的、纯化的、适应BHK细胞的NDV耐热株,命名为TS09-C株.TS09-C株的生物学特性测定结果表明:TS09-C株已经由鸡胚适应毒转变为细胞适应毒,且保持了其母本株原有的无毒和耐热的特性.TS09-C株的F和HN基因序列分析结果表明:与TS09株相比,TS09-C株的基因序列发生了较为明显的改变,但TS09、TS09-C和V4株仍保持着较近的遗传进化关系.本研究为今后以异源传代细胞生产NDV耐热疫苗奠定了理论基础和实验依据,同时也为NDV耐热株反向遗传操作系统的建立提供了合适的细胞模型.

摘要： 提供了一种使诱导性多能干细胞(iPSC)分化成肾近端小管细胞(PTC)样细胞的方法。所述方法包括在足以诱导iPSC分化成PTC样细胞的条件下，在存在一种或更多种细胞外基质(ECM)分子、骨形态形成性蛋白2(BMP2)和骨形态形成性蛋白7(BMP7)的肾上皮细胞培养介质中，培养未分化的iPSC，持续约8天至约10天的时间。还提供了一种分化的PTC样细胞的细胞群，以及使用所述细胞群的用途和方法。

摘要： 一种由多能干细胞制造肾祖细胞的方法，包括以下的工序(i)～(vi)。(i)将多能干细胞用含有FGF2、BMP4、GSK‑3β抑制剂和视黄酸或其衍生物的培养基培养的工序；(ii)将工序(i)中得到的细胞用含有FGF2、GSK‑3β抑制剂和BMP7的培养基培养的工序；(iii)将工序(ii)中得到的细胞用含有FGF2、GSK‑3β抑制剂、BMP7和TGFβ抑制剂的培养基培养的工序；(iv)将工序(iii)中得到的细胞用含有FGF2、GSK‑3β抑制剂、BMP7、激活素和ROCK(Rho激酶)抑制剂的培养基培养的工序；(v)将工序(iv)中得到的细胞用含有视黄酸或其衍生物和FGF9的培养基培养的工序；以及(vi)将工序(v)中得到的细胞用含有GSK‑3β抑制剂和FGF9的培养基培养、由间介中胚层细胞诱导肾祖细胞的工序。

摘要： 本发明提供一种由间介中胚层细胞产生肾前体细胞的方法，所述方法包括将间介中胚层细胞在含有TGFβ信号激活剂及BMP抑制剂的培养基中进行培养的工序；以及通过该方法所产生的肾前体细胞；含有该细胞的药物组合物及含有该细胞的肾病治疗剂。

摘要： 提供了一种使诱导性多能干细胞(iPSC)分化成肾近端小管细胞(PTC)样细胞的方法。所述方法包括在足以诱导iPSC分化成PTC样细胞的条件下，在存在一种或更多种细胞外基质(ECM)分子、骨形态形成性蛋白2(BMP2)和骨形态形成性蛋白7(BMP7)的肾上皮细胞培养介质中，培养未分化的iPSC，持续约8天至约10天的时间。还提供了一种分化的PTC样细胞的细胞群，以及使用所述细胞群的用途和方法。

摘要： 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种宜肝乐片在制备抑制肾透明细胞腺癌细胞786‑O细胞增殖药物中的应用及宜肝乐片的制备方法。所述宜肝乐片由鸡矢藤200g、虎杖160g、马鞭草200g、六月雪200g、马兰草200g、茅莓200g、吉祥草170g、功劳木100g、冷水花70g作为原料药制成，采用超临界萃取制备而成，使得大黄素含量有很大提高。

摘要： 本发明涉及一种肾微器官构建方法，具体涉及一种采用成体肾前体细胞经悬浮分化培养后构建肾微器官的方法和应用，包括如下步骤：S1：对肾前体细胞进行传代培养，待生长至对数期且达到足够数量后，收集肾前体细胞进行悬浮培养，得到肾前体细胞团；S2：对肾前体细胞团进行分化培养3‑14天，得到肾微器官。与现有技术相比，本发明采用简便、快捷的尿液分离和悬浮分化培养方式就可诱导肾前体细胞分化成具有不同分化细胞群体且呈现类似于肾脏空间结构的“迷你肾脏”，在药物筛选、生理病理学研究、个性化治疗、细胞治疗等方面具有良好的应用价值。

摘要： 本发明涉及诱导尿液细胞直接重编程为肾祖细胞的方法，以及包含通过该方法重编程的肾祖细胞的、用于预防或治疗肾细胞损伤疾病的药物组合物。本发明可以通过使用尿液细胞，一种可以轻易重复地获得而无不便和痛苦的体细胞，来进行定制的重编程的肾祖细胞的大规模生产，因此可以应用于可扩展到肾损伤治疗和肾脏再生领域的不治之症领域，并应用于细胞治疗产品的生产。

摘要： 本文尤其提供了使用经遗传修饰的生物活性肾细胞群体为天然肾提供再生效果以治疗慢性肾疾病的组合物和方法。在某些实施方案中，目的是有效提供“通用供体”免疫豁免的肾细胞群体，其中将基因编辑用于产生经修饰的同种异体肾细胞群体以在无免疫抑制的情况下施用于患者。

摘要： 本发明属于病毒疫苗生产技术领域，具体涉及一种乳仓鼠肾细胞BHK‑21‑E‑200及作为病毒疫苗生产细胞株的应用。本发明提供了一种能够稳定传代且高产口蹄疫病毒疫苗的细胞株BHK‑21‑E‑200，相较原始BHK‑21细胞，所述的细胞株BHK‑21‑E‑200的146s含量提升90％，且无外源性污染；而且所述的细胞株BHK‑21‑E‑200的单位细胞产毒量较原始BHK‑21细胞升高90％以上，且生长速率较原始BHK‑21细胞提升，能够用于口蹄疫病毒疫苗的高效生产。

摘要： 本发明公开了非洲绿猴肾细胞的全悬浮细胞株及其应用。本发明的非洲绿猴肾细胞的全悬浮细胞株已于2021年10月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.23098。本发明采用非洲绿猴肾细胞的全悬浮细胞株生产猪乙型脑炎病毒抗原，较传统转瓶培养工艺、较大的简化了生产工艺，降低了生产成本。