circPTPRA与miR-1252在胃癌中的表达及其对细胞生物学行为的影响

摘要

目的 探讨circPTPRA与miR-1252在胃癌中的表达及其对胃癌细胞生物学行为的影响.方法 取术中切除的胃癌组织与癌旁组织(距癌组织>5 cm处的组织)进行实验,随后采用qRT-PCR检测胃癌组织、癌旁组织中circPTPRA与miR1252的表达情况.体外培养人胃癌细胞HGC-27,分别转染pcDNA、pcDNA-circPTPRA、si-NC、si-circPTPRA、anti-miR-NC、antimiR-1252、共转染pcDNA-circPTPRA和miR-NC、共转染pcDNA-circPTPRA和miR-1252 mimics.CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;Transwell小室实验检测细胞迁移,Transwell Matrigel体外侵袭实验检测细胞侵袭;双荧光素酶报告基因实验检测circPTPRA与miR-1252的靶向关系;Western blot检测MMP-2、MMP-9蛋白表达量.结果 与癌旁组织比较,胃癌组织中circPTPRA的表达量显著降低(P<0.05),miR-1252的表达量显著升高(P<0.05).与转染pcDNA组比较,转染pcDNA-circPTPRA组细胞活力显著降低,G0/G1期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低,细胞迁移数及侵袭数显著减少,MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05).circPTPRA能够靶向结合miR-1252;转染pcDNAcircPTPRA组miR-1252的相对表达量显著降低(P<0.05);转染si-circPTPRA组miR-1252的相对表达量显著升高(P<0.05).与转染anti-miR-NC组比较,转染anti-miR-1252组细胞活力显著降低,G0/G1期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低,细胞迁移及侵袭数显著减少,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与共转染pcDNAcircPTPRA和miR-NC组比较,共转染pcDNA-circPTPRA和miR-1252 mimics组细胞活力显著升高,G0/G1期细胞比例显著降低,S期细胞比例显著升高,迁移及侵袭细胞数显著增多,MMP-2、MMP-9蛋白表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 circPTPRA过表达可通过负向调控miR-1252而抑制胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及诱导细胞周期阻滞.