芒果炭疽病菌lac基因的克隆

摘要

利用植物基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)(TIANGEN)提取芒果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)DNA为模板,参考文献资料设计特异性引物,利用聚合酶链反应(PCR)扩增得到长度约920bp的基因片段,再用DNA回收试剂盒回收此片段,将其与载体pMD18-T过夜连接后转化到感受态大肠杆菌JM109中,电泳检测克隆结果后,选择阳性克隆菌液,寄往上海国家人类基因组南方研究中心测序,测序结果与NCBI网站中的参考序列进行同源比对,结果显示该片段与多个植物病原真菌的编码漆酶的lac基因同源性达到70%～92%,这表明本试验扩增克隆获得的lac基因片断是正确的,但未克隆到全长。