光谱测定法检测蛋白质S-亚硝基化修饰

摘要

目的 :探讨用光谱测定法对蛋白质的S亚硝基化修饰进行检测。方法 :以牛血清白蛋白 （BSA）作目标蛋白 ,在酸性条件下用亚硝酸盐使BSA发生S亚硝基化修饰 ,Hg2 + 离子解离亚硝基化蛋白的NO基团 ,所生成的NO与磺胺形成的重氮化物 ,再与乙二胺形成显色产物 ,其光密度值在一定的范围内与NO基团的浓度成线性关系 ,用亚硝酸盐所制作的标准曲线可定量检测目标蛋白的S亚硝基化修饰。结果与结论 :亚硝酸盐在 4 .0× 10 3～ 6× 10 2mmol L浓度范围与显色产物的光密度值存在良好线性关系 ,在总体蛋白中可检测到的S亚硝基化蛋白的比率为 1 10。光谱测定法是检测蛋白质S亚硝化修饰的一种简便易行的方法