一种简易冷冻保存细胞方法

摘要

本实验介绍一种简易分段冷冻保存细胞的方法,即将0.5～1×10~7细胞悬浮于4℃细胞冷冻液（10%DMSO,30%小牛血清,60%RPMI-1640）1ml,并置于冷冻管中。将此管置于-8℃～-12℃甲醇冰浴（甲醇:冰块=1∶1v/v）,5～10min后用2～3cm厚棉垫将此管包裹,置于国产生物液氮容器颈部-70℃处4h,最后投入液氮中。细胞复苏时,将此冷冻管置于37℃水浴中,一俟细胞悬液溶化,立即加入RPMI-1640培养液中并离心沉淀,将沉淀细胞悬浮含10%小牛血清RPMI-1640培养液中待用。用此冷冻人骨髓细胞,CFU-C回收率常高于60%。