长链非编码RNA HIF1α-AS1在血管内皮细胞缺氧损伤中的作用研究

摘要

目的检测长链非编码RNA缺氧诱导因子-1alpha-反义链1(lncRNA HIF-1α-AS1)在缺糖缺氧血管内皮细胞中的表达及对细胞缺氧应激损伤的影响。方法原代培养人脐静脉血管内皮细胞并建立缺糖缺氧模型,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)方法从95种长链非编码RNA中筛选出缺糖缺氧后表达差异显著的基因lncRNA HIF-1α-AS1。用流式细胞仪、TUNEL/Hochest检测细胞凋亡情况。siRNA干扰lncRNA HIF1α-AS1表达后,通过乳酸脱氢酶漏出率、Western blot检测超氧化物歧化酶1(SOD1)表达等方法评估细胞损伤情况。结果血管内皮细胞建立缺糖缺氧模型后,lncRNA HIF-1α-AS1含量显著上升1.98倍(P<0.05)。对lncRNA HIF-1α-AS1进行干扰后,3个干扰组细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出率与模型组相比显著下降,siRNA1组为20.84%±2.64%(P<0.05),siRNA2组为19.82%±1.61%(P<0.01),siRNA3组为17.01%±0.24%(P<0.01)。siRNA2和siRNA3的SOD1基因mRNA水平显著上调(P<0.01);2组SOD1蛋白表达量也明显上升,siRNA2(P<0.05),siRNA3(P<0.01),细胞损伤减轻。结论干扰lncRNA HIF-1α-AS1的表达能够减轻血管内皮细胞缺糖缺氧后的损伤,提高细胞的抗缺氧能力,这可能与SOD1表达量升高、乳酸脱氢酶漏出减少有关。