河南叶县岩盐可培养中度嗜盐菌的多样性

摘要

[背景]嗜盐微生物因为独特的生理和代谢特征而对高盐环境有着良好的适应能力,在环境污染治理、酶制剂等领域具有很高的应用和研究价值,是一类重要的极端环境微生物资源.[目的]为了更好地认识我国岩盐微生物的多样性,开发和利用嗜盐微生物资源,积累丰富的微生物菌种资源.[方法]在5％和10％的盐度下,使用Alkaline oligotrophic medium(AOM)、Neutral haloarchaeal medium(NHM)、Diluted modified marine agar(dmMA)和ISP3 medium(ISP3)四种培养基,分离和纯化河南叶县岩盐矿的卤水和盐土中的嗜盐菌,使用细菌通用引物27F和1492R扩增和测序纯化菌株的16S rRNA基因,使用EzBioCloud和NCBI上的BLAST比对进行分子鉴定,使用MEGA 5.0进行遗传进化分析.[结果]从河南叶县岩盐卤水和盐土中一共分离和纯化到78株细菌,菌株16SrRNA基因序列显示它们来自3个门:厚壁菌门(Firmicutes)的Bacillus 26株、Halobacillus 30株、Oceanobacillus 10株和Staphylococcus 1 株;变形菌门(Proteobacteria)的Sphingomonas 3株和Halomonas 5株;放线菌门(Actinobacteria)的Brevibacterium 3株.Halobacillus和Bacillus的细菌在叶县岩盐可培养中度嗜盐菌中具有较高的丰度.AOM培养基分离出了最多5个属的细菌,并且仅从AOM培养基分离出了Sphingomonas和Brevibacterium的细菌;另外,仅从ISP3分离出了Oceanobacillus的细菌;4种培养基都培养出了Halobacillus 和Bacillus 的细菌.来自卤水的有Bacillus、Halobacillus、Oceanobacillus、Sphingomonas 和 Staphylococcus;来自盐土有Bacillus、Brevibacterium、Halomonas.另外,5％和10％两个盐度下都纯化出Bacillus、Brevibacterium、Halobacillus 和Sphingomonas;仅在10％的盐度下纯化到Halomonas和Oceanobacillus的细菌;仅在5％的盐度下培养出一株Staphylococaus.[结论]揭示了河南叶县岩盐可培养中度嗜盐菌的多样性,发现Halobacillus和Bacillus在可分离培养的中度嗜盐菌中具有较高的丰度,为深入开展岩盐嗜盐微生物研究积累了较为丰富的微生物菌株资源.