中华眼镜蛇细胞毒素及其偶联膀胱癌单克隆抗体的体外抑制膀胱癌细胞增殖的实验研究

摘要

目的 从中华眼镜蛇的四种细胞毒素(cytotoxins,CTXs)中筛选活性最强的一种与膀胱癌单克隆抗体构建成免疫毒素(immunotoxin IT),并研究IT的体外抑制膀胱癌细胞增殖的活性.方法 [3H]-TdR掺入法检测CTXs对膀胱癌细胞株的抑制增殖作用,用双功能偶联剂将CTX-12与:BDI-1连接成IT,并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、DAB染色法和[3H]-TdR掺入法鉴定和检测IT的活性.结果 四种CTXs对BIU-87和EJ细胞株均有抑制增殖的活性,CTX-12与BDI-1能够连接成IT,IT对BIU-87和EJ细胞株具有特异性结合性.且IT仍具有抑制肿瘤细胞增殖的活性,其BIU-87,EJ和Lovo细胞作用6h的IC50分别为97.12,85.28和193.4mg/L,而作用半小时更换培养液培养至6h的IC50分别为94.64,81.28和865mg/L.结论 四种CTXs对膀胱癌细胞株均有抑制增殖的活性,CTX-12与BDI-1连接的IT具有特异性抑制增殖的活性,IT和四种CTXs都有潜力成为新的抗膀胱癌药物.