沙眼衣原体ompA真核表达重组体的构建及鉴定

摘要

目的　扩增D型沙眼衣原体ompA基因 ,构建真核表达重组质粒 ,为核酸疫苗的研制做准备。方法　用PCR技术从D型Ct基因组DNA中扩增ompA基因片段 ,重组入pUCm -T克隆载体。将pUCm -T/ompA中的ompA外源基因片段经酶切、连接等反应 ,亚克隆入pcDNA3.1 ( + )真核表达载体 ,再经含氨苄青霉素的LB培养基筛选 ,酶切、PCR扩增及测序鉴定。结果　从D型Ct基因组DNA中扩增出特异的ompA基因片段 ,筛选出pUCm -T/ompA ;经亚克隆 ,筛选鉴定出pcDNA3.1 ( + ) /ompA重组质粒。结论　成功地构建了pUCm -T/ompA重组质粒和pcDNA3.1 ( + ) /ompA重组质粒 ,为Ct核酸疫苗的研制提供实验基础。