木香烃内酯对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞成骨性分化的影响

摘要

目的研究木香烃内酯对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨性分化的影响。方法取SPF级SD大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓贴壁培养法进行BMSCs原代细胞培养。将培养后的细胞分为木香烃内酯组(用10^(-5)~10^(-8) mol/L木香烃内酯干预)和对照组(用等体积二甲基亚砜木香烃内酯载体溶液干预)。干预9 d后检测碱性磷酸酶(ALP)活性,以筛选木香烃内酯最佳作用浓度;后用最佳作用浓度的木香烃内酯对体外培养原代BMSCs进行干预,干预12 d后行茜素红染色观察钙化结节形成情况,干预24 h后采用RT-PCR法检测BMP-2、RUNX-2和CollagenⅠ基因表达情况,干预48 h后采用Western blot法检测BMP-2、RUNX-2和CollagenⅠ蛋白表达情况。结果10^(-6) mol/L木香烃内酯干预大鼠BMSCs 9 d后ALP活性最高,确定此为其最佳作用浓度;木香烃内酯组钙化结节阳性克隆数显著高于对照组(P<0.01);木香烃内酯组成骨活性相关基因和蛋白BMP-2、RUNX-2和CollagenⅠ表达显著高于对照组(P<0.05或P<0.01)。结论10^(-6) mol/L木香烃内酯可促进体外培养BMSCs成骨性分化。