不同低氧浓度对人脐带间充质干细胞向神经细胞分化的影响

摘要

目的探讨不同低氧浓度对人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）诱导分化成神经细胞的促进作用。方法hUCMSCs分为对照组（常氧浓度）和实验组（5%氧浓度组、10%氧浓度组）。MTT法检测细胞增殖;乳酸脱氢酶（LDH）法检测细胞损伤;流式细胞仪检测细胞凋亡; Weston Blot检测细胞神经生长因子（NGF）、神经巢蛋白（Nestin）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达。结果 hUCMSCs细胞在缺氧条件下细胞增殖受到抑制,培养24 h内实验组OD值显著低于对照组（P ＜0. 05）,随着培养时间的延长,实验组细胞增殖加快,到培养至96 h时实验组与对照组比较差异无统计学意义（P＞ 0. 05）。在培养24、48 h时,实验组hUCMSCs细胞LDH活性显著高于对照组（P ＜0. 05）;培养至72 h后5%氧浓度组LDH活性显著高于对照组（P ＜0. 05）,10%氧浓度组与对照组比较差异无统计学意义（P＞0. 05）;培养至96 h后各组hUCMSCs细胞LDH的活性比较差异无统计学意义（P＞ 0. 05）。5%氧浓度组hUCMSCs细胞抗凋亡作用强于10%氧浓度组（P ＜0. 05）。缺氧培养的hUCMSCs细胞更早出现神经元样形态学变化,且细胞中NGF、Nestin、NSE的表达水平高于对照组（P ＜0. 05）。结论 5%氧浓度缺氧培养的hUCMSCs细胞具有抗细胞凋亡作用,同时对成神经诱导分化具有促进作用。