环状RNA MYLK对子宫内膜癌细胞生长凋亡和侵袭及上皮间质转换的影响

摘要

目的 探讨环状RNA MYLK干扰对子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖、凋亡、侵袭和上皮间质转化(EMT)的作用及对小鼠异种移植瘤生长的影响.方法 MYLK-shRNAs转染HEC-1A细胞,构建MYLK干扰细胞模型.将转染后的HEC-1A细胞皮下注射裸鼠,建立移植瘤裸鼠模型.体外实验分为对照组、shRNA-NC组、circMYLK-shRNA1组、circMYLK-shRNA2组和circMYLK-shRNA3组,小鼠实验取shRNA-NC组和circMYLK-shRNA1组.RT-qPCR检测MLYK的表达并筛选出干扰效率高的干扰链;克隆形成实验检测细胞克隆形成情况;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell实验检测细胞侵袭;Western Blot检测EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达;免疫组化检测肿瘤组织的Ki67和Vimentin的表达.结果 三种shRNAs干扰MYLK,shRNA1干扰效率最佳,用于后续实验.与对照组比较,circMYLK-shRNA1组的克隆形成率显著降低(P＜0.05),细胞凋亡率显著升高(P＜0.05),侵袭细胞数量显著减少(P＜0.05),E-cadherin的表达显著上调(P＜0.05),N-cadherin和Vimentin的表达显著下调(P＜0.05).体内实验中,与shRNA-NC组比较,circMYLK-shRNA1组肿瘤体积显著减小(P＜0.05),肿瘤重量显著减轻(P＜0.05),组织MYLK的表达显著下调(P＜0.05),组织Ki67和Vimentin的表达显著下调(P＜0.05).结论 MYLK干扰抑制了子宫内膜癌HEC-1A细胞的增殖、凋亡、侵袭和上皮间质转化,也阻碍了小鼠异种移植瘤的生长.