Resistin对人肾小球系膜细胞表型和功能的作用及机制研究

摘要

目的 研究巨噬细胞因子抵抗素(Resistin)过度表达对高糖刺激作用下人肾小球系膜细胞p38MAPK信号通路的影响,探讨Resistin调控肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质积聚的作用机制.方法 通过转染携带野生型Reaistin基因的腺病毒载体(Ad-Resistin)构建过度表达Resistin的人巨噬细胞模型,并与高糖刺激后的人肾小球系膜细胞共培养,3H-氚标胸腺嘧啶掺入实验检测肾小球系膜细胞增殖,免疫细胞化学检测系膜细胞增殖相关基因(AP-1)的表达,免疫荧光检测细胞外基质蛋白(Laminin)的蛋白表达,Western blot检测系膜细胞内p38MAPK、TGF-B的表达并洲定Smad2的磷酸化水平.结果 Ad-Resistin感染后,人巨噬细胞Resistin mRNA水平及蛋白表达明显升高(P<0.01).同过度表达Resistin的人巨噬细胞共培养后,与对照组比较,人肾小球系膜细胞p38MAPK、TGF-13的蛋白表达明显增强,细胞内Smad2的磷酸化水平显著升高(P<0.05),肾小球系膜细胞出现明显的增殖,细胞外基质的合成增多(P<0.05).结论 巨噬细胞因子Resistin的过度表达可能通过p38MAPK信号通路,调控高糖刺激作用下肾小球系膜细胞的增殖及细胞外基质的异常积聚.