鞘内注射ETAR拮抗药对大鼠骨癌疼痛改善情况及其对ERK通路的影响

摘要

目的 观察鞘内注射内皮素A受体(ETAR)拮抗药对大鼠骨癌疼痛(BCP)改善作用及其对细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路的影响.方法 取60只大鼠均进行鞘内置管,随机分为假手术(sham)组、假手术+ETAR拮抗药(sham+BQ123)组、骨癌痛(BCP)组、骨癌痛+ETAR拮抗药(BCP+BQ123)组.BCP组、BCP+BQ123组采用股骨远端骨髓腔内接种Walker256细胞法建立BCP大鼠模型,sham组、sham+NS同法注射等量生理盐水.建模成功大鼠于建模第14天,BCP+BQ123组和sham+BQ123组各14只,鞘内注射7μl BQ123;BCP组13只、sham组14只鞘内注射等量生理盐水.鞘内注射前即刻、注射后0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h分别评估各组大鼠疼痛行为学:机械性缩足反射阈值(PWT)、自发抬足次数(NSF);末次评估疼痛行为学后,影像学评估各组骨质破坏情况;RT-qPCR、Western blot法检测脊髓组织中内皮素1(ET1)、ETAR、ERK1/2 mRNA和蛋白表达量及p-ERK1/2蛋白表达量.结果 与sham组、sham+BQ123组比较,注射前BCP组、BCP+BQ123组的PWT降低和NSF增多(P<0.05),鞘内注射后T0.5～3.0 h期间,BCP组的PWT和NSF均保持不变,而BCP+BQ123组的PWT先升高后降低,NSF先减少后增多,PWT和NSF均于1.5 h达到最高和最少,3.0 h恢复至注射前水平.胫骨骨质X线片显示,sham组和sham+BQ123组胫骨骨质密度均匀、骨皮质连续无缺失;BCP组注射后14 d出现大范围骨破坏、骨皮质缺损严重;BCP+BQ123组股骨远端见较小骨破坏病灶,部分皮质缺损.与sham组、sham+BQ123组比较,BCP组、BCP+BQ123组脊髓ET1、ETAR mRNA和蛋白及p-ERK1/2蛋白相对表达量均升高,且BCP+BQ123组低于BCP组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 BCP疼痛反应与脊髓ET-1及ETAR有关,鞘内注射ETAR拮抗药可有效减轻BCP大鼠的疼痛反应,可能通过抑制脊髓ERK通路发挥调控作用.