一种新的人端粒相关蛋白T-STAR的克隆及功能分析

摘要

目的　筛选、鉴定新的人端粒相关蛋白 ,为进一步了解端粒酶全酶的结构、生物学功能及其作用机制奠定实验基础。　方法　采用研究蛋白质间相互作用非常有效的分子生物学方法酵母双杂交技术、哺乳细胞双杂交技术进行人端粒相关蛋白分子的筛选、鉴定。　结果　成功构建端粒酶催化亚单位诱饵融合蛋白表达载体 p GBKT7- h TERT,无自身激活活性 ,p G-BKT7- h TERT融合蛋白在酵母细胞 AH10 9内有效稳定表达。以 p GBKT7- h TERT为诱饵进行 c DNA文库筛选 ,将阳性克隆质粒 c DNA测序 ,同源性比较获得了已收录人 c DNA序列 T- STAR。成功构建真核表达载体 p VP16 - T- STAR、p M- h TERT,证明 T- STAR与 h TERT在哺乳细胞内发生相互作用。 T- STAR m RNA在正常胃粘膜组织低表达 ,在胃癌细胞内高表达。　结论　 T- STAR是人端粒相关蛋白新成员 ,可能参与酪氨酸蛋白激酶信号传递并通过介入 h TERT的磷酸化或去磷酸化调节端粒酶的活性。