抑制螺旋藻胞内核酸酶活性的研究

摘要

螺旋藻细胞内较高的胞内核酸酶活性是外源基因转化螺旋藻的主要障碍.以供体质粒 pEUTISI为酶消化底物,通过多种方法处理螺旋藻细胞,然后检测其胞内核酸酶粗提液对 pEUTISI的降解作用,结果表明, 2 mmol/L以上的 EDTA处理 16 h或无 Mg2+螺旋藻培养基培养 72 h以上,都可使处于对数生长期的螺旋藻胞内核酸酶活性显著降低;低于 28℃ (如 24℃ )培养也可降低螺旋藻的胞内核酸酶活性.根据实验结果,建议在螺旋藻转化前 72 h开始低温、无 Mg2+培养,转化前 16 h提高培养基中 EDTA的浓度至 2 mmol/L,就能获得胞内核酸酶活性极低的受体藻,有利于外源基因的转化.