大腹园蛛主壶腹腺蛛丝蛋白末端结构域的克隆表达

摘要

牵引丝(dragline silk)由主壶腹腺蛛丝蛋白(major ampullate spidroin,MaSp)组成,是蜘蛛丝中强度最好的丝,同时具有极佳的生物相容性和可降解性,因此引起研究者的研究热潮.目前关于大腹园蛛MaSp结构和成丝机理方面的研究甚少,限制了其仿生应用.本文以大腹园蛛牵引丝的组成蛋白质之一MaSpl为研究对象,通过锚定PCR的方法首次获取了大腹园蛛MaSpl NT的完整编码基因,并对其进行了克隆、表达、纯化,产量可达60 mg/L;同时对该MaSpl的CT进行表达纯化,产量可达80 mg/Lc另外,通过CD色谱分析了MaSpl NT和CT的二级结构,结果表明二者的二级结构均以α-螺旋为主.上述结果为大腹园蛛MaSp1的结构和成丝机理研究奠定了基础.