利用转座系统在葡糖杆菌中表达山梨糖脱氢酶

摘要

目的:利用Mini-Tn5转座系统在葡糖杆菌中表达山梨糖脱氢酶(SDH).方法:分离得到从山梨醇产糖的快生型小菌Y25K2,利用PCR方法扩增并分析快生型小菌的16S rDNA;构建pUT-mini-Tn5-Tet转座载体,将SDH基因(sdh)插入该载体,利用接合转移,将sdh整合至快生型小菌Y25K2的染色体,通过Western印迹检测SDH的表达.结果:16S rDNA鉴定结果初步表明快生型小菌为葡糖杆菌;构建得到pUT-mini-Tn5-Tet-sdh,将sdh整合至快生型菌Y25K2基因组,并检测到其在快生型小菌Y25K2中的表达.结论:利用Mini-Tn5转座系统在葡糖杆菌中表达了山梨糖脱氢酶.