抗增殖蛋白在酵母双杂交系统中转录激活作用的检测

摘要

目的:检测抗增殖蛋白在酵母双杂交系统中是否具有转录自激活作用.方法:采用PCR方法扩增抗增殖蛋白基因全长序列,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pGBKT7-pHB,制备酵母菌AH109感受态细胞,将pGBKT7-PHB转化感受态酵母菌AH109后培养于含缺失培养基的平板上,检测β-半乳糖苷酶活性,判定其是否具有转录自激活作用.结果:扩增出抗增殖蛋白基因全长序列,构建了诱饵载体pGBKT7-PHB,转化酵母菌AH109后在双缺和三缺培养基上未能使β-半乳糖苷酶活性滤纸片变蓝,说明报告基因未被激活.结论:抗增殖蛋白没有转录自激活作用,可用于酵母双杂交系统.