人miR-17-92基因簇载体构建及其在293T细胞中的表达验证

摘要

目的:研究人miR-17-92基因簇在肾癌等疾病发生过程中的功能.方法:采用基因重组技术,将miR-17-92基因簇亚克隆至pcDNA4真核细胞表达载体,构建miR-17-92基因簇真核表达载体;通过脂质体转染的方法将miR-17-92的过表达质粒和对照质粒分别转染293T细胞,并用实时定量PCR技术验证转染24和48 h后细胞内pri-miR-17-92和miR-17、miR-18a、miR-19a、miR-19b1、miR-20a、miR-92a1等分子的相对过表达比例.结果:miR-17-92基因簇真核表达载体构建成功,并在293T细胞中实现了显著性过表达效果.结论:为进一步研究人miR-17-92基因簇在肾脏发育过程中的功能及其与肾脏癌症发病相关性的研究提供了实验基础.